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血培養(yǎng)技術(shù)診斷菌血癥的最新進(jìn)展與質(zhì)量控制

2020/11/4 14:37:17

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作者:胡云建
單位:國(guó)家衛(wèi)健委北京醫(yī)院檢驗(yàn)科


摘要


血流感染是指病原菌入侵血循環(huán)進(jìn)行繁殖導(dǎo)致嚴(yán)重后果的疾病。而血培養(yǎng)高度敏感,易于操作,是目前確定血液感染病因的主要方法。本文主要闡述血培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展,包括自動(dòng)培養(yǎng)儀的研發(fā),培養(yǎng)基成分的調(diào)整。同時(shí)對(duì)于存在的高污染率的預(yù)防和滯后的菌種鑒定手段等問題進(jìn)行了闡述,并從目前普遍使用的方法,包括規(guī)范取樣技術(shù),引進(jìn)計(jì)算機(jī)先進(jìn)算法,利用分子檢測(cè)手段降低標(biāo)本的污染率和降低人為判斷失誤,加強(qiáng)菌種的鑒定能力及質(zhì)量指標(biāo)幾個(gè)方面重點(diǎn)進(jìn)行探討,提出污染預(yù)防和診斷手段提高的重要性。

血流感染是指各種病原微生物侵入血循環(huán),在血液中繁殖、釋放毒素和代謝產(chǎn)物,并誘導(dǎo)細(xì)胞因子的釋放,引起全身感染、中毒和全身炎癥反應(yīng),進(jìn)而進(jìn)一步引發(fā)血壓下降、導(dǎo)致凝血和纖溶系統(tǒng)的改變,從而引起全身多器官功能障礙,這是一種以高發(fā)病率和死亡率為特征的嚴(yán)重疾病[1],因此病原微生物的快速檢測(cè)十分關(guān)鍵。另外通過指導(dǎo)臨床醫(yī)生調(diào)整抗感染治療,可以避免無效治療,減少抗感染治療的范圍。比如限制耐藥菌株的選擇,以及限制選擇某些廣譜抗生素或聯(lián)合治療可能會(huì)對(duì)有益菌產(chǎn)生毒性和負(fù)面影響。再則,一般來說血液中的微生物含量比較低,可低至1-10CFU/ml,檢測(cè)的難度很大。所以找到血培養(yǎng)高度敏感,易于操作,迅速確定血液感染病因的方法一直是我們努力的方向。此外,含有豐富營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)瓶通常被用來進(jìn)行血培養(yǎng),從而檢測(cè)需氧菌和厭氧菌的生長(zhǎng)。標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)時(shí)間一般是5天,可讓大部分微生物恢復(fù)活力,包括一些苛養(yǎng)菌。有時(shí)候也需要適當(dāng)增加培養(yǎng)時(shí)間使生長(zhǎng)較慢的微生物達(dá)到儀器自動(dòng)報(bào)警的檢出限,比如真菌和分枝桿菌[2]等。為了提高血培養(yǎng)的檢測(cè)能力,研究人員從開發(fā)自動(dòng)培養(yǎng)儀[3-5],調(diào)整培養(yǎng)基的成分[6, 7]來提升效率,通過規(guī)范采樣技術(shù),引進(jìn)計(jì)算機(jī)先進(jìn)算法,利用分子檢測(cè)手段[8]來減低標(biāo)本的污染率,去除人為的判斷,加強(qiáng)菌種的鑒定能力。


血培養(yǎng)最新進(jìn)展


1. 血培養(yǎng)儀器:血培養(yǎng)方法經(jīng)歷從手工、半自動(dòng)(放射性)、侵入性半自動(dòng)、非侵入性全自動(dòng)、高度全自動(dòng)的發(fā)展歷程。傳統(tǒng)手工法是將血液標(biāo)本置于增菌肉湯中孵育,肉眼判斷是否有細(xì)菌生長(zhǎng),頻率為每天1次,有生長(zhǎng)跡象進(jìn)行鏡檢和轉(zhuǎn)種,否則繼續(xù)孵育,一般為7天。手工檢測(cè)敏感度較低,受主觀因素的影響,且不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)陽性標(biāo)本。隨后人們逐漸把重點(diǎn)放到了自動(dòng)化培養(yǎng)和檢測(cè)技術(shù)的升級(jí)中?,F(xiàn)代化的實(shí)驗(yàn)室一般依靠自動(dòng)培養(yǎng)儀來監(jiān)控病原微生物的生長(zhǎng)情況。檢測(cè)原理一般基于病原微生物生長(zhǎng)代謝產(chǎn)生的二氧化碳濃度變化來監(jiān)控微生物的生長(zhǎng)情況。早期的半自動(dòng)血培養(yǎng)儀先后通過14C標(biāo)記培養(yǎng)基,紅外線穿刺檢測(cè)等來實(shí)現(xiàn),但因?yàn)榉派湫园踩?、“有?chuàng)性”檢測(cè)引入外界污染等缺陷,血培養(yǎng)檢測(cè)效率依然較低[9]。1985年Dr. Thurman Thorpe及其團(tuán)隊(duì)發(fā)明可以用于檢測(cè)細(xì)菌生長(zhǎng)的內(nèi)部檢測(cè)傳感器,提出“非侵入性”血培養(yǎng)檢測(cè)理念。1989年生物梅里埃公司(bioMérieux)開發(fā)了全球首臺(tái)BacT/ALERT 3D全自動(dòng)培養(yǎng)儀,通過監(jiān)測(cè)微生物代謝產(chǎn)生的二氧化碳引起含有標(biāo)本的培養(yǎng)瓶的底部感應(yīng)器發(fā)生的顏色變化(由灰變黃),隨之處理以圖像及聲音進(jìn)行警示,Bact/ALERT與主服務(wù)器相連可使測(cè)試功能進(jìn)一步自動(dòng)化[9]。隨后美國(guó)BD公司研發(fā)的BACTEC™ FX血液自動(dòng)培養(yǎng)儀利用了產(chǎn)生的二氧化碳導(dǎo)致熒光的變化來檢測(cè)微生物生長(zhǎng)情況,其可遠(yuǎn)程獲得的實(shí)時(shí)培養(yǎng)結(jié)果,從而提高臨床決策和實(shí)驗(yàn)室工作流程。


近年生物梅里埃公司推出的新一代VIRTUO全封閉自動(dòng)化培養(yǎng)系統(tǒng),與BacT/Alert 3D系統(tǒng),BACTEC FX等上一代培養(yǎng)系統(tǒng)相比,整合上、下載、標(biāo)簽掃碼等更多手工步驟為自動(dòng)化運(yùn)行,避免因?yàn)轭l繁開合箱體引起的培養(yǎng)溫度波動(dòng)。VIRTUO的全封閉式箱體可維持恒定培養(yǎng)溫度(35-37℃),更有利于促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)。同時(shí)Virtuo改進(jìn)傳統(tǒng)斜率算法為RAUC(曲線下面積)、R2R(讀數(shù)讀取變化)和EI(早期讀數(shù)分析)三種算法結(jié)合,更快地檢測(cè)微生物是否報(bào)陽。相比于3D系統(tǒng)[10-12]和BACTEC FX系統(tǒng)[13-16],可縮短20%檢測(cè)時(shí)間(time to detection)[17-18]。Miller N等比較VIRUTO與3D系統(tǒng)在8種常見病原體檢出時(shí)間差異,VIRTUO檢測(cè)需氧和兼性厭氧微生物的時(shí)間明顯縮短,平均減少約3小時(shí),脆弱擬桿菌TTD差異最大,中位改善為46.7小時(shí)[11]。Liottie FM等針對(duì)BACTEC FX,3D和VIRTUO系統(tǒng)的評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn),按菌種區(qū)分VIRTUO至少可節(jié)省2小時(shí)報(bào)陽時(shí)間。同時(shí)因?yàn)閂IRTUO獨(dú)有的自動(dòng)上、下載功能,比較血培養(yǎng)瓶操作過程BACTEC FX系統(tǒng)需要11步,而VIRTUO僅需1步,大大節(jié)省血培養(yǎng)手工操作[19]。


2. 血培養(yǎng)瓶成分的研究進(jìn)展:在自動(dòng)培養(yǎng)儀發(fā)展的基礎(chǔ)上,調(diào)整培養(yǎng)基成分也是提高感染病原微生物的檢出效率的重要因素。已經(jīng)接受抗生素治療的病人血液標(biāo)本中會(huì)含有抗生素,導(dǎo)致血培養(yǎng)過程中病原菌生長(zhǎng)速度緩慢,錯(cuò)過最佳的抗感染治療調(diào)整時(shí)機(jī)。培養(yǎng)基中加入活性碳或樹脂可以幫助中和取樣前的抗生素,從而幫助更快的檢測(cè)到微生物的復(fù)蘇[20]?;钚蕴佳囵B(yǎng)瓶以生物梅里埃生產(chǎn)的BacT Alert FAN為代表。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道活性碳瓶相比于未添加抗生素中和劑的標(biāo)準(zhǔn)血培養(yǎng)瓶能提高陽性率[6, 7]。盡管在檢測(cè)時(shí)間上活性碳瓶和標(biāo)準(zhǔn)瓶沒有明顯差異,但是在金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、酵母菌等的檢出率上,活性碳瓶有明顯優(yōu)勢(shì)[7]。


樹脂血培養(yǎng)瓶以美國(guó)BD公司生產(chǎn)的BACTEC Aerobic/F Plus和生物梅里埃近年新上市的BacT/ALERT FAN Plus為主要代表。其中BacT/ALERT FAN Plus還添加能夠吸附碳青酶烯類抗生素的專利化學(xué)吸附劑[21]。樹脂瓶顯示比活性碳瓶更佳的病原菌檢出性能和更短的報(bào)陽時(shí)間,其中在1507例需氧瓶和2386例厭氧瓶對(duì)比試驗(yàn)中,BacT/ALERT FA plus和FN plus均顯著提高金黃色葡萄球菌和總微生物的生長(zhǎng)恢復(fù),相比活性碳瓶檢出時(shí)間縮短2-2.4小時(shí)[22]。Chen IH等利用體外模擬驗(yàn)證不同品牌樹脂瓶生長(zhǎng)性能發(fā)現(xiàn),BacT/Alert FA plus與Bactec Aerobic/F Plus瓶接種抗生素與銅綠假單胞菌檢測(cè)時(shí)間相似,而在大腸桿菌和肺炎克雷伯菌中BacT/Alert FA plus培養(yǎng)時(shí)間更短。BacT/ALERT FN plus瓶比BACTEC Anaerobic/F Plus瓶在美羅培南和亞胺培南回收上有更好效果,整體恢復(fù)率更高[23, 24]。Lovern D等利用反相高效液相色譜評(píng)價(jià)不同樹脂血培養(yǎng)瓶中的抗生素結(jié)合及細(xì)菌生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)研究顯示,BacT/ALERT FA PLUS針對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素,喹諾酮類,達(dá)托霉素,頭孢洛林等吸附速率顯著優(yōu)于BACTEC Anaerobic/F Plus[25]。Fiori B等開展1032套血培養(yǎng)前瞻性臨床比對(duì)發(fā)現(xiàn),BacT/ALERT FAN plus相比BACTEC Plus樹脂瓶,對(duì)陽性球菌、陰性菌檢出率更高,整體報(bào)陽時(shí)間無顯著性差異,但對(duì)于治療失敗(經(jīng)驗(yàn)性治療無法覆蓋病原體)的血培養(yǎng)組,BacT/ALERT FAN plus瓶的檢出時(shí)間更短[26]。


3. 病原菌的分離和鑒定:確定陽性血液標(biāo)本之后進(jìn)行病原菌的鑒定對(duì)后續(xù)有針對(duì)性的治療也十分關(guān)鍵。目前的鑒定方法可以分為以下幾種,亞培養(yǎng)獲取純菌落,新型的陽性血樣的分子檢測(cè)法。


(1)亞培養(yǎng)獲取純菌落:可以進(jìn)行短時(shí)間的亞培養(yǎng)來獲得純菌落,從而進(jìn)行傳統(tǒng)的生化檢測(cè),包括基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時(shí)間質(zhì)量光譜法(MALDI-TOFMS),PCR和基因測(cè)序。


(2)新型的分子檢測(cè)法:核酸擴(kuò)增法是最常用的鑒定病原體的方法。多聚PCR使用通用引物靶向細(xì)菌(16S)或真菌(18S)基因組的保守rDNA區(qū)域,隨后通過測(cè)序?qū)?種特異性實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)對(duì)微生物進(jìn)行鑒定,比如膿毒癥流芯片(Master Diagnostica)和ePlex®。原位雜交法利用兩個(gè)互補(bǔ)核酸鏈的特異性結(jié)合,其中一個(gè)探針是已知的核酸序列,另一個(gè)是未知微生物基因組的一部分。特異性的結(jié)合可以被熒光顯微鏡捕捉到,包括PNA-FISH®,QuickFISH®,AccuProbe®,Accelerate PhenoTM等。DNA微陣列雜交法由固定在固體表面的短寡核苷酸組成,同時(shí)、并行地檢測(cè)許多病原體及其抗菌素耐藥基因。DNA微陣列所覆蓋的物種一般約占已知引起血流感染的病原體的90-95%,其敏感性在10^1-10^5細(xì)胞/mL之間[8]。


4. 血培養(yǎng)瓶報(bào)陽后的直接藥敏試驗(yàn):血培養(yǎng)瓶報(bào)陽后,由于不能對(duì)血培養(yǎng)瓶中細(xì)菌數(shù)量按藥物敏感性試驗(yàn)要求進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化,其次用來檢測(cè)的少量血液混合物樣本可能含附加劑(如血液中的抗菌藥物、抗凝劑和其他附加劑)等因素影響,一般不建議做直接藥敏實(shí)驗(yàn),盡管該方法可減少結(jié)果報(bào)告所需的時(shí)間。近年來,血培養(yǎng)瓶報(bào)陽后,直接快速的抗菌藥物敏感性試驗(yàn)有了如下進(jìn)展:


(1)EUCAST:于2018年11月28日發(fā)布陽性血培養(yǎng)快速藥敏方法(RAST),包含了短時(shí)間培養(yǎng)方法及抑菌圈直徑折點(diǎn)表用于判定結(jié)果,于2019年05月02日進(jìn)行了修訂。其操作方法:當(dāng)血培養(yǎng)報(bào)陽后,報(bào)陽后0-18小時(shí)后的血培養(yǎng)瓶適用于此方法,在進(jìn)行測(cè)試前無需提前從血培養(yǎng)儀中取出血培養(yǎng)瓶,從血培養(yǎng)瓶中直接取:125±25μL,可使用3方向擦拭涂布的標(biāo)準(zhǔn)方法或平板旋轉(zhuǎn)器進(jìn)行接種并涂布MH平板完成藥敏接種,并貼上抗菌藥物紙片,35℃培養(yǎng)。在孵育4,6,8小時(shí)后分別讀取藥敏結(jié)果,不同的孵育時(shí)間有相應(yīng)的折點(diǎn)和結(jié)果解釋標(biāo)準(zhǔn),從培養(yǎng)基正面量取抑菌圈直徑。需要注意事項(xiàng):可直接使用血培養(yǎng)陽性瓶中的液體進(jìn)行接種,無需離心或稀釋;目前適用的血培養(yǎng)瓶包括(BACTEC,Bact/ALERT和Thermo);只有存在明顯抑菌圈邊緣時(shí),才能量取,否則需要延長(zhǎng)孵育時(shí)間;平板孵育及判讀時(shí)間不應(yīng)超過8小時(shí);使用血培養(yǎng)報(bào)陽后直接藥敏測(cè)試(RAST)的折點(diǎn)而非常規(guī)EUCAST細(xì)菌耐藥折點(diǎn)。在進(jìn)行結(jié)果解釋時(shí),需要進(jìn)行鑒定,根據(jù)鑒定結(jié)果選擇合適的表格進(jìn)行結(jié)果解釋。目前只有大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、糞腸球菌和屎腸球菌有結(jié)果解釋標(biāo)準(zhǔn):也就是說折點(diǎn)僅適用于規(guī)定的菌種和孵育時(shí)間,不適用于表中未包括的菌種和/或孵育時(shí)間,同時(shí)確保質(zhì)控結(jié)果在控。


(2)Accelerate Pheno檢測(cè)系統(tǒng):2017年2月,F(xiàn)DA批準(zhǔn)Accelerate Diagnostics公司銷售Accelerate Pheno system和Accelerate PhenoTest BC (血培養(yǎng))試劑盒,用于從陽性血培養(yǎng)標(biāo)本中直接鑒定14種常見病原菌和AST,以及直接鑒定兩種念珠菌(僅用于鑒定)。Accelerate PhenoTest BC試劑盒,包括48個(gè)流動(dòng)池通道,可裝載5ml陽性培養(yǎng)液。每個(gè)盒子內(nèi)包含兩個(gè)凝膠電泳站和熒光原位雜交探針(用于鑒定)、抗菌藥物和其他必需的試劑(用于自動(dòng)標(biāo)本制備、對(duì)目標(biāo)細(xì)菌和真菌進(jìn)行鑒定以及對(duì)目標(biāo)細(xì)菌做AST)。對(duì)于每個(gè)標(biāo)本來說,Accelerate PhenoTest BC試劑盒加載的總勞動(dòng)時(shí)間小于10分鐘。用形態(tài)動(dòng)力學(xué)(細(xì)胞形態(tài)學(xué)、質(zhì)量、分裂速率、異質(zhì)性、細(xì)胞的異常生長(zhǎng)模式和微菌落)細(xì)胞分析方法作為時(shí)間推移圖像來分析子代克隆,圖像分析軟件生成生長(zhǎng)概率評(píng)分以及MICs基于祖細(xì)胞向子代細(xì)胞克隆生長(zhǎng)速率。儀器通過使用軟件從測(cè)量參數(shù)中計(jì)算出MIC值,并應(yīng)用基于2016 CLSI和FDA折點(diǎn)的專家規(guī)則。應(yīng)將檢測(cè)結(jié)果結(jié)合革蘭染色結(jié)果一起解釋。Charnot-Katsikas等人在臨床微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)通過連續(xù)對(duì)232瓶新鮮陽性血液培養(yǎng)中的241株病原菌(223瓶為單一病原菌和9瓶多個(gè)病原菌)進(jìn)行檢測(cè)來評(píng)價(jià)。在抗菌藥物敏感性檢測(cè)方面,與常規(guī)方法相比,總的基本一致率為95.1%,分類一致性為95.5%。與標(biāo)準(zhǔn)流程相比,Accelerate Pheno system對(duì)病原菌鑒定的時(shí)間和AST的時(shí)間分別減少了23.47h和41.86h[27]。


血培養(yǎng)的質(zhì)量控制


1. 污染率:研究報(bào)道的最多的血培養(yǎng)質(zhì)量指標(biāo)是污染率。一般建議血培養(yǎng)的污染率應(yīng)保持在或低于 3%。血液標(biāo)本污染會(huì)造成培養(yǎng)結(jié)果的假陽性,從而導(dǎo)致嚴(yán)重的后果。因此降低污染率會(huì)提高血培養(yǎng)檢測(cè)的特異性,為隨后的治療提供更好的保障。目前已經(jīng)被確認(rèn)可降低污染的步驟包括皮膚消毒準(zhǔn)備工作、培養(yǎng)瓶的消毒、瓶接種使用單針和雙針、使用專門的抽血小組,使用商業(yè)血液培養(yǎng)采集試劑盒等。由于皮膚通常被認(rèn)為是最可能污染血樣的來源,所以可采用聚乙烯吡咯酮碘,碘酒,含酒精的產(chǎn)品作為皮膚消毒的主要物質(zhì)。但是即使采用皮膚消毒也是不能絕對(duì)完全防止皮膚菌群對(duì)于血液培養(yǎng)的污染,因?yàn)闄z測(cè)到多達(dá)20%的皮膚相關(guān)細(xì)菌可在消毒后仍具有存活能力。大量的歷史數(shù)據(jù)顯示皮膚消毒劑并不像氯己定一樣有效。使用氯己定需要進(jìn)行培訓(xùn), 以實(shí)現(xiàn)有效的皮膚消毒, 另外采用雙針,即丟棄用于抽取血液培養(yǎng)物的針,使用新的針來進(jìn)行接種被認(rèn)為是可以減低污染率[28]的有效方法。


既然無法完全消除標(biāo)本污染的概率,那么鑒定假陽性和菌血癥成了另一個(gè)挑戰(zhàn)。臨床醫(yī)生通常采用以下方法進(jìn)行鑒別:1)菌種鑒定。常規(guī)上金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、大腸桿菌等腸桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌等通常被認(rèn)為是導(dǎo)致菌血癥或真菌血癥的菌種。而凝固酶陰性葡萄球菌、棒狀桿菌種類、炭疽桿菌以外的芽孢桿菌種類、痘丙酸桿菌、微球菌種類、綠藻群鏈球菌、腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌等則通常被認(rèn)為是污染菌。2)陽性血培養(yǎng)的套數(shù)。多套陽性培養(yǎng)瓶長(zhǎng)出了同一個(gè)菌種,說明是菌血癥。但是如果僅一套培養(yǎng)長(zhǎng)出了通常被認(rèn)為是污染源的菌種,則被認(rèn)為是假陽性。3)在一套血培養(yǎng)中的陽性瓶數(shù)。僅一個(gè)培養(yǎng)瓶長(zhǎng)出微生物,說明假陽性的概率很高。4)培養(yǎng)時(shí)間。菌血癥組的菌量通常比污染組的大,所以真陽性組的培養(yǎng)時(shí)間通常較短。5)數(shù)據(jù)分類技術(shù)的引進(jìn)。感染控制活動(dòng)是高度數(shù)據(jù)密集的,衛(wèi)生保健信息技術(shù)為改進(jìn)監(jiān)測(cè)和報(bào)告系統(tǒng)的效率提供了巨大的潛力。針對(duì)血液培養(yǎng)污染的挑戰(zhàn),研究人員已經(jīng)探索了采用自動(dòng)的、基于計(jì)算機(jī)的算法對(duì)培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行分類,從而辨別可能的污染物或病原體。在大量的血培養(yǎng)數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上,結(jié)合病人的生命體征和用藥數(shù)據(jù)來建立預(yù)測(cè)模型,其準(zhǔn)確度通??梢赃_(dá)到,甚至超過感染控制人員的判斷水平。這種方法至少有兩個(gè)潛在的好處:在面對(duì)不明確的培養(yǎng)結(jié)果時(shí)協(xié)助臨床解釋和決策,以及為醫(yī)院感染和血流感染率的監(jiān)測(cè)提供客觀的、可重復(fù)的、成本效益高的方法[28]。


2. 采血量:采血量是決定血培養(yǎng)檢出率關(guān)鍵變量[29],對(duì)于檢測(cè)膿毒癥的病原菌來說,抽足量的血標(biāo)本比抽血時(shí)間更重要。Donnino MW等研究發(fā)現(xiàn)多數(shù)血培養(yǎng)瓶采血量一般低于指南推薦[30]。采血量過少會(huì)影響陽性檢出率,過多血細(xì)胞的呼吸作用會(huì)造成假陽性等。目前,三甲評(píng)審檢查內(nèi)容分類匯總(檢驗(yàn)科),除查危急值報(bào)告制度和流程(血培養(yǎng)危機(jī)值回報(bào))外,還查標(biāo)本驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)(血量檢查);CNAS CL02醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則中,原始標(biāo)本采集的類型和量要求實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期評(píng)審靜脈穿刺取血(及取其他標(biāo)本如腦脊液)所需的標(biāo)本量,以保證采樣量符合要求;CAP認(rèn)證要求除血培養(yǎng)污染率外,也要求血量檢測(cè)。


血培養(yǎng)瓶中有足夠的采血量,如果采血量不在規(guī)定的范圍內(nèi), 應(yīng)告知送檢醫(yī)生和護(hù)士, 并建議重新采集血培養(yǎng)。常用評(píng)估采血量有肉眼觀察法及稱重法。盡管肉眼觀察操作起來很容易, 但因培養(yǎng)瓶的壁厚、人主觀判斷等因素, 因此該方法有一定誤差。相比之下, 稱重和與已知標(biāo)準(zhǔn)比較重量更為客觀。目前自動(dòng)化血培養(yǎng)系統(tǒng)可提供的血量監(jiān)測(cè)技術(shù)包括BACT FX系統(tǒng)通過Epicenter中間件利用血細(xì)胞代謝批量(25瓶/批)間接測(cè)量血容量[31],VIRTUO則通過直接液面測(cè)量實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)單瓶采血容量[17]。VITRO還可以對(duì)不同科室的采血量進(jìn)行統(tǒng)計(jì),此數(shù)據(jù)對(duì)護(hù)士規(guī)范化采血培訓(xùn)很有幫助。


3. 血培養(yǎng)的套數(shù):另一項(xiàng)常用的質(zhì)量評(píng)估指標(biāo)是每次敗血癥期采集血培養(yǎng)的套數(shù)。采集的套數(shù)應(yīng)該遵循我國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)2019年發(fā)布《臨床微生物檢驗(yàn)標(biāo)本的采集和轉(zhuǎn)運(yùn)》。如果已在抗菌藥物治療之前抽取了多套血培養(yǎng),當(dāng)患者使用抗菌藥物后還是同樣高熱發(fā)作時(shí)不建議再作血培養(yǎng),因?yàn)樵僮龅难囵B(yǎng)罕見有陽性結(jié)果。血培養(yǎng)真正的陽性率應(yīng)該在6-12%范圍內(nèi),如果過低,可能同一患者送檢血培養(yǎng)次數(shù)過多,陽性率過高,則說明送檢的血培養(yǎng)數(shù)量多于推薦量,不符合血培養(yǎng)送檢要求。


結(jié) 論


血流感染是一種高發(fā)病率,高死亡率的疾病。血培養(yǎng)具有多種臨床作用——預(yù)后、指導(dǎo)治療、監(jiān)測(cè)療效、流行病學(xué)分析,在短期內(nèi),任何新技術(shù)都不可能完全取代血培養(yǎng)。目前普遍使用的自動(dòng)培養(yǎng)儀進(jìn)行血培養(yǎng)的方法,在儀器自動(dòng)化功能,血培養(yǎng)瓶成分改進(jìn)方面均有較大的發(fā)展,極大程度優(yōu)化傳統(tǒng)血培養(yǎng)流程,提高了檢測(cè)效率。但依然存在標(biāo)本污染現(xiàn)象,導(dǎo)致一定假陽性率。在加強(qiáng)質(zhì)量控制的基礎(chǔ)上,使用先進(jìn)的分子鑒定技術(shù)和以計(jì)算機(jī)為基礎(chǔ)的大數(shù)據(jù)分析手段為未來實(shí)現(xiàn)快速和高效的診斷提供發(fā)展方向。新技術(shù)和血培養(yǎng)正被整合成為一種檢測(cè)策略,且兩者都能發(fā)揮各自的優(yōu)勢(shì)。


參考文獻(xiàn)略


注:本文來源于《臨床實(shí)驗(yàn)室》雜志2020年第10期“感染性疾病”專題




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