(浙江省腫瘤醫(yī)院,浙江杭州　310022)

【關(guān)鍵詞】　定位顯色;培養(yǎng)基;應(yīng)用評(píng)價(jià)

【中圖分類號(hào)】R378　　　　【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

　　尿道感染為臨床常見的感染性疾病之一,快速而準(zhǔn)確的鑒定出病原菌并給予準(zhǔn)確的藥敏結(jié)果才能正確治療。傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)法程序繁瑣,常常不能及時(shí)鑒定出病原菌以致延誤診斷。筆者用科瑪嘉尿道定位培養(yǎng)基,取得了較好的結(jié)果。

1　材料與方法

1. 1　標(biāo)本來源　浙江省腫瘤醫(yī)院2004年6月~2005年7月門診及住院患者經(jīng)無菌操作留取的642份中段尿標(biāo)本,立即送檢。

1. 2　干粉培養(yǎng)基　科瑪嘉尿道定位培養(yǎng)基,麥康凱瓊脂,血瓊脂。

1. 3　其他材料　VITEK-32微生物鑒定儀及GPI、GNI+鑒定卡為生物梅里埃產(chǎn)品,微量生化管為杭州天和微生物試劑有限公司產(chǎn)品。

1. 4　培養(yǎng)方法　收集的臨床標(biāo)本用定量接種環(huán)分別接種血平板、麥康凱平板和科瑪嘉尿道定位培養(yǎng)基, 37℃培養(yǎng)24 h觀察結(jié)果,記錄菌落生長顏色并用生化微量管和(或)VITEK-32進(jìn)行鑒定。

2　結(jié)果

642份臨床標(biāo)本中有287份培養(yǎng)陽性,并對(duì)這些陽性標(biāo)本分別用傳統(tǒng)方法和尿道菌定向培養(yǎng)法鑒定細(xì)菌,鑒定結(jié)果見

表1。

表1　287例尿液陽性標(biāo)本分離鑒定和菌落顏色變化

 菌種                             傳統(tǒng)鑒定      尿道定位顯色       顏色

 大腸埃希菌                      165　　         165　　       粉紅色

 腸球菌屬                          32　             32　         藍(lán)綠色,較淺

 肺炎克雷伯菌                    20　             20　         藍(lán)綠色,較深,有粘性

 表皮葡萄球菌                    25　             25　         白色至淡黃色

 弗氏枸掾酸鹽復(fù)合菌            6                 6               藍(lán)色

 腸桿菌屬                           8                 8               翠綠色

 變形桿菌屬                          5                 5               褐色,有遷徒現(xiàn)象

 白色念珠菌                          8                 8               乳白色

 不動(dòng)桿菌屬                          4                 4               乳白色

 銅綠假單胞菌                       4                 4               咖啡色,有金屬光澤

 金黃色葡萄球菌                   3                 3               金黃色,較小

 少動(dòng)鞘氨醇單胞菌                3                 3               奶油色,半透明

 鏈球菌屬                              2                 2               天藍(lán)色

 嗜麥芽寡糖養(yǎng)單胞菌             1                 1               奶油色,半透明

 粘質(zhì)沙雷菌                        1                 1               墨綠色

 

3　討論

通過科瑪嘉尿道定位顯色培養(yǎng)基與血平板的平行對(duì)照實(shí)驗(yàn)方法,對(duì)臨床收集的中段尿標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng)和鑒定,結(jié)果顯示2種培養(yǎng)基的檢出率差異無顯著性,其靈敏度和特異性基本一致。檢測結(jié)果顯示,引起尿道感染的主要致病菌為大腸埃希

菌(57.5%)、腸球菌屬(11.2%)、表皮葡萄球菌(8.7%)、肺炎克雷伯菌(7.0%)等。由于大腸埃希菌在定位培養(yǎng)基上呈現(xiàn)出明顯的粉紅色,顏色特異,極易辨認(rèn),因此培養(yǎng)基允許用吲哚試驗(yàn)來鑒定大腸埃希菌;常見的腸球菌尤其是糞腸球菌在定位培養(yǎng)基上呈清晰、細(xì)小的藍(lán)綠色,在定位培養(yǎng)基上呈現(xiàn)滲入性生長,一目了然,結(jié)合血平板上的菌落特征,可以作出尿道感染的快速診斷;銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌等細(xì)菌生長特有的色素或粘性在定位培養(yǎng)基上都能顯現(xiàn),僅需要進(jìn)行幾個(gè)目的生化試驗(yàn)即可明確結(jié)果,特別是變形桿菌,可以在尿道定位培養(yǎng)基上使用苯丙氨酸試驗(yàn)(Fed3)來鑒定;但對(duì)于不動(dòng)桿菌屬、沙雷菌屬、凝固酶陰性葡萄球菌、腸桿菌屬等少見感染菌的鑒定不是很理想,因?yàn)檫@些菌具有相似的菌落形態(tài)與顯色,尚需要進(jìn)一步的生化試驗(yàn)來確定。傳統(tǒng)的鑒定方法常需要麥康凱和血平板進(jìn)行互補(bǔ),只能區(qū)別乳糖陽性和乳糖陰性,很難區(qū)分是否有混合感染。尿道定位顯色不僅顯示快速,對(duì)于占尿道感染菌的60%~70%的大腸埃希菌和腸球菌可以直接準(zhǔn)確鑒定,減少培養(yǎng)后所需要的生化鑒定試劑及工作量。由于定位培養(yǎng)基上不同的細(xì)菌僅菌落本身呈現(xiàn)特定的顏色,菌落周圍培養(yǎng)基并不著色,很容易從混合感染標(biāo)本中辨認(rèn)出2種或2種以上的目標(biāo)菌,不易漏檢,且顯色的菌落不影響生化鑒定。鑒于定位培養(yǎng)基上菌落產(chǎn)生特定顏色的原理是在培養(yǎng)基中加入檢測某些菌中特異性酶的底物,因而此培養(yǎng)基也可以用來鑒定其它感染區(qū)域例如創(chuàng)傷、燒傷以及胸腹水等部位不同的微生物。

總而言之,使用尿道定位培養(yǎng)基做尿道病原菌的分離和鑒定具有直觀和易于鑒定的特點(diǎn),可簡化鑒定程序,大大提高實(shí)驗(yàn)室的檢測效率,有助于泌尿道感染的快速診斷,值得推廣應(yīng)用。